pBiT3.1-N[CMV/HiBiT/Blast] Vector

pBiT3.1 HiBiT vektory jsou určené k připojení 11 aminokyselin dlouhou HiBiT značku na N nebo C konec cílového proteinu. Tyto vektory obsahují mnohočetné klonovací místo pro vytvoření HiBiT fúzního proteinu. pBiT3.1 vektory mohou být použity pro přechodnou i stabilní transfekci a kódují kanamycinovou rezistenci pro bakteriální selekci a blasticidinovou rezistenci pro selekci savčích buněk. Délka flexibilního linkeru mezi proteinem a HiBiT je závislá na tom, jakou restriktázou použijete pro štěpení.

pBiT3.1-N [CMV/HiBiT/Blast] Vector připojuje HiBiT značku na N konec cílového genu. Insert by měl obsahovat stop kodon na 3' konci pro ukončení translace.

pBiT3.1-C [CMV/HiBiT/Blast] Vector připojuje HiBiT značku na C konec cílového genu. Insert by neměl obsahovat stop kodon a sledovaný gen by měl obsahovat sekvenci pro správnou iniciaci sekvence zahrnující N-terminální ATG kodon nebo Kozakovu sekvenci.

pBiT3.1-secN [CMV/HiBiT/Blast] Vector připojuje HiBiT značku na N-konec transmembránového nebo sekretovaného proteinu. Tento vektor kóduje IL-6 signální sekreční peptid na N-konci HiBiT značky pro přímý trafficking značeného proteinu do plazmatické membrány savčích buněk a následnou sekreci do média nebo expresi na povrchu buňky. Insert by měl také obsahovat stop kodon na 3' konci pro ukončení translace.